핵산 검출에 대해, 얼마나 알고 계시나요?

2024/06/27 11:47

코로나19 사태 이후 핵산검사는 자주 등장하는 단어가 됐다. 핵산 검사 양성은 코로나19 진단의 중요한 기준이다. WST-8은 핵산 테스트 키트의 API가 되었습니다. 핵산검사에 대해 얼마나 알고 계시나요? 핵산 검출의 원리는 무엇입니까? 핵산 검사에 위음성이 나타나는 이유는 무엇입니까? 핵산 검사 외에 어떤 다른 기술로 신형 코로나바이러스를 탐지할 수 있나요?

신형 코로나바이러스의 핵산 검출 원리를 밝히다

핵산검사는 실제로 피험자의 체내에 신형 코로나바이러스의 핵산(RNA)이 있는지를 검출하는 것이다. 각 바이러스의 핵산에는 리보뉴클레오티드가 포함되어 있으며, 서로 다른 바이러스에 포함된 리보뉴클레오티드의 수와 순서가 다르기 때문에 각 바이러스를 특이적으로 만듭니다.

신형 코로나바이러스의 핵산도 독특하며, 핵산 검출은 신형 코로나바이러스의 핵산을 특이적으로 검출하는 것입니다. 핵산 검사 전 피험자의 객담, 인후 면봉, 기관지폐포세척액, 혈액 등의 검체를 채취해야 하며, 이러한 검체를 검사함으로써 피험자의 호흡기관이 세균에 감염되었음을 확인할 수 있다. 신형 코로나바이러스 핵산 검출은 일반적으로 인후 면봉 샘플 검출에 사용됩니다. 검체를 분할 정제한 뒤, 그로부터 신종 코로나바이러스 가능성이 있는 핵산을 추출해 검사 준비가 완료된다.

신형 코로나바이러스 핵산 검출은 형광 정량 PCR 기술과 RT-PCR 기술을 결합한 형광 정량 RT-PCR 기술을 주로 사용한다. 검출 과정에서 RT-PCR 기술을 사용하여 신형 코로나바이러스의 핵산(RNA)을 해당 디옥시리보핵산(DNA)으로 역전사합니다. 그런 다음 형광 정량 PCR 기술을 사용하여 얻은 DNA를 대량으로 복제합니다. 복제된 DNA는 성 탐침으로 검출되고 표지됩니다. 새로운 코로나바이러스 핵산이 있는 경우, 장비는 형광 신호를 감지할 수 있으며, DNA가 계속 복제됨에 따라 형광 신호가 계속 증가하여 간접적으로 새로운 코로나바이러스의 존재를 감지할 수 있습니다.

핵산

위음성은 왜 발생하는가?

위음성은 검사를 받은 사람이 신형 코로나바이러스에 감염되었으나 바이러스의 핵산이 검출되지 않은, 즉 핵산 검사가 음성인 것을 의미한다. 피험자에게 관련 증상이 없고 핵산 검사가 음성인 경우 경계심을 늦추기 쉬우며 이로 인해 바이러스가 더 널리 퍼질 수 있으며 이는 신형 코로나바이러스의 간계이기도 합니다.

위음성(false negatives)이 발생하는 주요 이유는 세 가지입니다.

첫째, 원본 검체 내 신형 코로나바이러스의 핵산 함량이 너무 낮아 검출 하한치보다 낮았다. 이는 수집된 샘플 유형 및 수집 시기와 관련이 있습니다.

둘째, 신형 코로나바이러스 핵산이 프로브에 결합하는 부위에 돌연변이가 생기면 검출 시 프로브의 결합 효율에 영향을 미쳐 검출할 수 없는 형광 신호가 나타날 수 있다.

셋째, 위음성은 탐지 기술의 민감도와도 관련이 있습니다. 발병 초기에는 임상키트의 완성도가 낮고 민감도가 높지 않아 위음성이 빈번하게 보고됐다. 이후 기술 수준이 향상되면서 검출 정확도가 급격히 높아졌고, 위음성률은 지속적으로 감소했습니다.

핵산 검사 양성이 진단인가요?

핵산검사 결과 양성으로 대상자의 상기도에 바이러스성 핵산이 존재함을 확인할 수 있으나, 직접적으로 신형관상동맥폐렴 환자로 진단할 수는 없습니다. 핵산검사가 양성인 경우에는 역학적 병력을 토대로 추가 진단을 실시해야 한다. 접촉 이력 등을 확인하면 확진자로 진단할 수 있습니다.

대상자에게 관련 증상이 없으면 일반적으로 무증상 감염으로 진단됩니다. 무증상 감염자도 전염성이 있는데, 일부 무증상 감염자는 나중에 증상을 보이기 시작해 확진자가 됐다.

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새로운 코로나 바이러스를 탐지하는 다른 기술

피험자의 경우 검체에서 바이러스를 분리하는 것이 진단의 가장 권위 있는 근거입니다. 그러나 바이러스 분리는 상대적으로 위험한 작업으로 보호 수준이 높은 실험실에서 수행해야 하며 시간과 비용이 많이 듭니다. . 일반 의료기관에는 이런 조건이 없습니다. 대부분 피험자가 바이러스에 감염되었는지 여부를 판단하기 위해 혈액에 바이러스 항체가 있는지 여부를 검출하는 방법을 사용하게 된다. B형 간염, 에이즈 등은 모두 이런 방식으로 검사됩니다.

이 면역학적 검출법으로 신형 코로나바이러스도 검출할 수 있다. 새로운 코로나바이러스의 침입에 직면하여 인체는 "저항"하고 특정 항체 IgM 및 IgG(면역글로불린 M 및 면역글로불린 G)를 생성합니다. 피험자의 혈액에서 이 두 가지 특정 항체가 검출되면 피험자가 신형 코로나바이러스에 감염되었음을 나타낼 수 있습니다.

항체를 검출하는 방법은 무엇입니까? 일반적으로 사용되는 방법은 화학발광 면역분석법, 즉 화학발광 시약이나 특정 효소를 사용하여 항체나 항원을 표지하고, 면역 반응에 의해 복합체를 형성한 후, 세척 후 발광 시약을 첨가하는 방법이다. 종 특이적 항체인 화학발광 기기는 발광 신호를 감지할 수 있습니다. 이 화학발광 면역분석법은 현재 가장 발전된 면역분석 기술 중 하나입니다. 높은 민감도, 강한 특이성, 넓은 감지 범위 및 빠른 결과를 제공하지만 감지 비용이 높습니다.

또한 인체가 바이러스에 감염되면 항체가 생성되기까지 일정 시간이 걸리기 때문에 항체가 생성된 후에야 검출이 가능해 항체 검출의 적시성도 떨어지는 문제도 있다. B형간염, 에이즈 등 감염 후 항체가 생성되기까지는 2~3주가 소요된다. 신형 코로나바이러스 감염 후 IgM 항체 검출에는 3일 이상, IgG 항체 검출에는 1주일 이상 소요된다.

따라서, 신형 코로나바이러스의 꼬리를 최대한 빨리 잡기 위해, 신형 코로나바이러스의 흔적을 조기에 검출할 수 있는 보다 많은 핵산 검출법이 사용된다.


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